從19年底疫情開始到現(xiàn)在,如果有一個(gè)行業(yè)實(shí)現(xiàn)乘風(fēng)波浪,那一定就是醫(yī)藥行業(yè)。從疫情初期的醫(yī)療防護(hù)用品的緊俏,到中期疫苗的研發(fā)與全民接種,直到現(xiàn)在的常態(tài)化核酸檢測(cè),無(wú)一不是在推動(dòng)醫(yī)藥行業(yè)的發(fā)展。其中生物藥憑借其藥理活性高、特異性強(qiáng)、治療效果好、毒副作用較小的特點(diǎn),已在全球醫(yī)藥市場(chǎng)大放異彩。
在生物藥制備中離不開細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)基將為細(xì)胞生長(zhǎng)提供所需基本物質(zhì),并且其物質(zhì)組成會(huì)影響產(chǎn)品的產(chǎn)量和結(jié)構(gòu),所以對(duì)培養(yǎng)基的篩選尤為重要。
如何高效分析細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)
細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)中一般都含有氨基酸、維生素、碳水化合物、無(wú)機(jī)鹽、多肽、蛋白質(zhì)和其他類化合物。細(xì)胞生長(zhǎng)過程中會(huì)消耗營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),同時(shí)釋放目標(biāo)生物藥物和廢棄產(chǎn)物。
氨基酸作為蛋白質(zhì)的基礎(chǔ),同時(shí)也是許多代謝途徑的中間介質(zhì)。是培養(yǎng)基中的必須成分,為細(xì)胞增殖和生存提供原料,其濃度可影響細(xì)胞密度。監(jiān)測(cè)和調(diào)整氨基酸的組成對(duì)于優(yōu)化生產(chǎn)過程,保證終產(chǎn)物的高質(zhì)量和高產(chǎn)量是很有必要的。
我們提供一種高效、快速的HPLC-柱后衍生法,利用陽(yáng)離子交換色譜結(jié)合茚三酮柱后衍生法可檢測(cè)對(duì)包括細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)在內(nèi)許多復(fù)雜基質(zhì)中的氨基酸進(jìn)行分析。
HPLC-柱后衍生法
圖1:流程圖
● 快速:ONYX PCX 搭載可程序升溫柱溫箱,可實(shí)現(xiàn)30min快速檢測(cè)幾十種氨基酸;
● 重復(fù)性高:柱后衍生方法具有很好的靈敏性、重復(fù)性和穩(wěn)定性;
● 操作簡(jiǎn)便:直接與HPLC連用,基質(zhì)中的大部分化學(xué)物質(zhì)不會(huì)干擾分析,分析前只需檸檬酸鹽緩沖溶液稀釋樣品并過濾;
● 提供應(yīng)用方案。
圖2:細(xì)胞培養(yǎng)基樣品色譜圖
該方法已經(jīng)成為并且將一直是實(shí)驗(yàn)室測(cè)試生物樣品、蛋白質(zhì)和多肽以及食品分析的重要方法。